nodgoРоссийский журнал детской гематологии и онкологии (РЖДГиО)Russian Journal of Pediatric Hematology and Oncology2311-12672413-5496LTD “Graphica”10.21682/2311-1267-2023-10-3-15-21nodgo-959Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL STUDIESАнализ профиля метилирования ДНК подтверждает содержание высокого процента иммунных клеток в образцах глиобластомAnalysis of DNA methylation profiles confirms a high proportion of immune cells in glioblastoma sampleshttps://orcid.org/0000-0003-2498-4713ПетроваЕ. И.PetrovaE. I.

младший научный сотрудник патологоанатомического отделения

125047, Москва, ул. 4-я Тверская-Ямская, 16

Research Assistant Pathology Department

16 4th Tverskaya-Yamskaya St., Moscow, 125047

petrova.katr@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-7531-6443ОльховаЛ. В.OlkhovaL. V.

к.м.н., врач-детский онколог отделения трансплантации костного мозга

119571, Москва, Ленинский просп., 117

Cand. of Sci. (Med.), Pediatric Oncologist, Department of Bone Marrow Transplantation

117 Leninskiy Prosp., Moscow, 117997

rylkova87@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9953-6654ГалстянС. А.GalstyanS. A.

врач-патологоанатом патологоанатомического отделения

 125047, Москва, ул. 4-я Тверская-Ямская, 16

Pathologist Pathology Department

16 4th Tverskaya-Yamskaya St., Moscow, 125047

 

sgalstyan@nsi.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0370-8667ТелышеваЕ. Н.TelyshevaE. N.

 к.б.н., биолог патологоанатомического отделения

125047, Москва, ул. 4-я Тверская-Ямская, 16

Cand. of Sci. (Biol.), Biologist Pathology Department

16 4th Tverskaya-Yamskaya St., Moscow, 125047

telisheva_k@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8607-3635ЖелудковаО. Г.ZheludkovaO. G.

д.м.н., профессор, эксперт ВАК по детской нейроонкологии, главный научный сотрудник; врач-детский онколог

119620, Москва, ул. Авиаторов, 38

194354, Санкт-Петербург, ул. Есенина, 2, корп. 3

Dr. of Sci. (Med.), Professor, Expert of the Higher Attestation Commission on Pediatric Neuro-Oncology, Chief Researcher of Practical Center for Specialized Medical Care for Children named after V.F. Voyno-Yasenetsky Moscow Healthcare Department, Pediatric Oncologist DTC IIBS named after S. Berezin

38 Aviatorov St., Moscow, 119620

Bldg. 3, 2 Yesenin St., S.-Petersburg, 194354

clelud@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7206-6365РыжоваМ. В.RyzhovaM. V.

Марина Владимировна Рыжова -  д.м.н., заведующая патологоанатомическим отделением

125047, Москва, ул. 4-я Тверская-Ямская, 16

Dr. of Sci. (Med.), Head of the Pathology Department

16 4th Tverskaya-Yamskaya St., Moscow, 125047

mrizhova@nsi.ruФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр нейрохирургии имени академика Н.Н. Бурденко» Минздрава РоссииРоссияN.N. Burdenko National Medical Research Center of Neurosurgery, Ministry of Health of RussiaRussian FederationРоссийская детская клиническая больница – филиал ФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава РоссииРоссияRussian Children’s Clinical Hospital – Branch of the N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, Ministry of Health of RussiaRussian FederationГБУЗ «Научно-практический центр специализированной медицинской помощи детям имени В.Ф. Войно-Ясенецкого Департамента здравоохранения города Москвы»; ООО «Лечебно-диагностический центр Международного института биологических систем имени Сергея Березина»РоссияScientific and Practical Center for Specialized Medical Care for Children named after V.F. Voyno-Yasenetsky Moscow Healthcare Department; Diagnostic and Treatment Center of International Institution for Biological Systems named after Sergey BerezinRussian Federation2023291120231031521Copyright © Петрова Е.И., Ольхова Л.В., Галстян С.А., Телышева Е.Н., Желудкова О.Г., Рыжова М.В., 20232023Петрова Е.И., Ольхова Л.В., Галстян С.А., Телышева Е.Н., Желудкова О.Г., Рыжова М.В.Petrova E.I., Olkhova L.V., Galstyan S.A., Telysheva E.N., Zheludkova O.G., Ryzhova M.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.nodgo.org/jour/article/view/959

Глиобластомы – класс злокачественных новообразований центральной нервной системы, представляющий особую сложность для молекулярной диагностики и подтверждения диагноза ввиду значительной внутриопухолевой гетерогенности. Помимо поиска характерных генетических мутаций, например IDH, H3F3A, в «горячих точках» G34 и К27, согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения, важную роль играет анализ эпигенома опухоли – определение ее класса по структуре метилирования ДНК и статуса метилирования конкретных участков генома, в частности области промотора гена MGMT. Исходя из практического опыта, результаты молекулярно-генетических исследований нередко оказываются противоречивыми из-за неоднородного клеточного состава глиобластом. В данной работе мы приводим серию наблюдений из 35 образцов глиобластом, где сопоставляем морфологические особенности и результаты анализа клеточных типов методом деконволюции на основе общих профилей метилирования ДНК. Согласно нашим результатам, образцы глиобластом мезенхимального класса могут содержать более 50 % неопухолевых иммунных клеток, что следует учитывать при генетических исследованиях данных опухолей.

Glioblastomas are malignant tumors that belong to the central nervous system and are challenging to diagnose due to their significant intratumoral heterogeneity, which makes molecular testing and diagnosis confirmation particularly difficult. In addition to identifying typical genetic mutations such as IDH, H3F3A G34 and K27, WHO recommendations emphasize the importance of analyzing the tumor epigenome to define its class based on DNA methylation patterns and methylation status of specific genomic regions, particularly the MGMT promoter region. Based on our clinical experience, molecular genetic studies sometimes yield contradictory results due to the heterogeneous cellular composition of glioblastomas. In this study, we present a series of observations made on 35 glioblastoma samples in which we compare the morphological features and the results of cell type detection by deconvolution method based on total DNA methylation profiles. Our results suggest that samples of mesenchymal class glioblastomas may contain over 50 % non-tumor immune cells, which should be considered in genetic testing of these tumors.

глиобластомаэпигенетика опухолей центральной нервной системымолекулярная диагностикаметилирование ДНКдеконволюция клеточных типовIllumina EPIC Methylation microarrayglioblastomaepigenetics of CNS tumorsmolecular diagnosticsDNA methylationcell type deconvolutionIllumina EPIC Methylation microarrayРабота выполнена при поддержке гранта Министерства образования и науки № 075-15-2021-1343 «Развитие биоресурсной коллекции опухолей нервной системы человека с молекулярно-генетической паспортизацией для персонифицированного лечения пациентов с нейроонкологическими заболеваниями».The study was financially supported by the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation (Agreement No. 075 15 2021 1343) “Development of a bioresource collection of tumors of the human nervous system with molecular genetic certification for personalized treatment of patients with neuro-oncological diseases”.ReferencesOstrom Q.T., Price M., Neff C., Cioffi G., Waite K.A., Kruchko C., Barnholtz-Sloan J.S. CBTRUS Statistical Report: Primary Brain and Other Central Nervous System Tumors Diagnosed in the United States in 2015–2019. Neuro Oncol. 2022;24(Suppl 5):v1–v95. doi: 10.1093/neuonc/noac202.Ostrom Q.T., Price M., Neff C., Cioffi G., Waite K.A., Kruchko C., Barnholtz-Sloan J.S. CBTRUS Statistical Report: Primary Brain and Other Central Nervous System Tumors Diagnosed in the United States in 2015–2019. Neuro Oncol. 2022;24(Suppl 5):v1–v95. doi: 10.1093/neuonc/noac202.Louis D.N., Ohgaki H., Wiestler O.D., Cavenee W.K. World Health Organization Classification of Tumours of the Central Nervous System. 4th ed., updated ed. Lyon: International Agency for Research on Cancer; 2016.Louis D.N., Ohgaki H., Wiestler O.D., Cavenee W.K. World Health Organization Classifi cation of Tumours of the Central Nervous System. 4th ed., updated ed. Lyon: International Agency for Research on Cancer; 2016.WHO Classification of Tumours Editorial Board. World Health Organization Classification of Tumours of the Central Nervous System. 5th ed. Lyon: International Agency for Research on Cancer; 2021.WHO Classifi cation of Tumours Editorial Board. World Health Organization Classifi cation of Tumours of the Central Nervous System. 5th ed. Lyon: International Agency for Research on Cancer; 2021.Sturm D., Witt H., Hovestadt V., Khuong-Quang D.A., Jones D.T., Konermann C., Pfaff E., Tönjes M., Sill M., Bender S., Kool M., Zapatka M., Becker N., Zucknick M., Hielscher T., Liu X.Y., Fontebasso A.M., Ryzhova M., Albrecht S., Jacob K., Wolter M., Ebinger M., Schuhmann M.U., van Meter T., Frühwald M.C., Hauch H., Pekrun A., Radlwimmer B., Niehues T., von Komorowski G., Dürken M., Kulozik A.E., Madden J., Donson A., Foreman N.K., Drissi R., Fouladi M., Scheurlen W., von Deimling A., Monoranu C., Roggendorf W., Herold-Mende C., Unterberg A., Kramm C.M., Felsberg J., Hartmann C., Wiestler B., Wick W., Milde T., Witt O., Lindroth A.M., Schwartzentruber J., Faury D., Fleming A., Zakrzewska M., Liberski P.P., Zakrzewski K., Hauser P., Garami M., Klekner A., Bognar L., Morrissy S., Cavalli F., Taylor M.D., van Sluis P., Koster J., Versteeg R., Volckmann R., Mikkelsen T., Aldape K., Reifenberger G., Collins V.P., Majewski J., Korshunov A., Lichter P., Plass C., Jabado N., Pfister S.M. Hotspot mutations in H3F3A and IDH1 define distinct epigenetic and biological subgroups of glioblastoma. Cancer Cell. 2012;22(4):425–37. doi: 10.1016/j.ccr.2012.08.024.Sturm D., Witt H., Hovestadt V., Khuong-Quang D.A., Jones D.T., Konermann C., Pfaff E., Tönjes M., Sill M., Bender S., Kool M., Zapatka M., Becker N., Zucknick M., Hielscher T., Liu X.Y., Fontebasso A.M., Ryzhova M., Albrecht S., Jacob K., Wolter M., Ebinger M., Schuhmann M.U., van Meter T., Frühwald M.C., Hauch H., Pekrun A., Radlwimmer B., Niehues T., von Komorowski G., Dürken M., Kulozik A.E., Madden J., Donson A., Foreman N.K., Drissi R., Fouladi M., Scheurlen W., von Deimling A., Monoranu C., Roggendorf W., Herold-Mende C., Unterberg A., Kramm C.M., Felsberg J., Hartmann C., Wiestler B., Wick W., Milde T., Witt O., Lindroth A.M., Schwartzentruber J., Faury D., Fleming A., Zakrzewska M., Liberski P.P., Zakrzewski K., Hauser P., Garami M., Klekner A., Bognar L., Morrissy S., Cavalli F., Taylor M.D., van Sluis P., Koster J., Versteeg R., Volckmann R., Mikkelsen T., Aldape K., Reifenberger G., Collins V.P., Majewski J., Korshunov A., Lichter P., Plass C., Jabado N., Pfi ster S.M. Hotspot mutations in H3F3A and IDH1 defi ne distinct epigenetic and biological subgroups of glioblastoma. Cancer Cell. 2012;22(4):425–37. doi: 10.1016/j.ccr.2012.08.024.Capper D., Jones D.T.W., Sill M., Hovestadt V., Schrimpf D., Sturm D., Koelsche C., Sahm F., Chavez L., Reuss D.E., Kratz A., Wefers A.K., Huang K., Pajtler K.W., Schweizer L., Stichel D., Olar A., Engel N.W., Lindenberg K., Harter P.N., Braczynski A.K., Plate K.H., Dohmen H., Garvalov B.K., Coras R., Hölsken A., Hewer E., Bewerunge-Hudler M., Schick M., Fischer R., Beschorner R., Schittenhelm J., Staszewski O., Wani K., Varlet P., Pages M., Temming P., Lohmann D., Selt F., Witt H., Milde T., Witt O., Aronica E., Giangaspero F., Rushing E., Scheurlen W., Geisenberger C., Rodriguez F.J., Becker A., Preusser M., Haberler C., Bjerkvig R., Cryan J., Farrell M., Deckert M., Hench J., Frank S., Serrano J., Kannan K., Tsirigos A., Brück W., Hofer S., Brehmer S., Seiz-Rosenhagen M., Hänggi D., Hans V., Rozsnoki S., Hansford J.R., Kohlhof P., Kristensen B.W., Lechner M., Lopes B., Mawrin C., Ketter R., Kulozik A., Khatib Z., Heppner F., Koch A., Jouvet A., Keohane C., Mühleisen H., Mueller W., Pohl U., Prinz M., Benner A., Zapatka M., Gottardo N.G., Driever P.H., Kramm C.M., Müller H.L., Rutkowski S., von Hoff K., Frühwald M.C., Gnekow A., Fleischhack G., Tippelt S., Calaminus G., Monoranu C.M., Perry A., Jones C., Jacques T.S., Radlwimmer B., Gessi M., Pietsch T., Schramm J., Schackert G., Westphal M., Reifenberger G., Wesseling P., Weller M., Collins V.P., Blümcke I., Bendszus M., Debus J., Huang A., Jabado N., Northcott P.A., Paulus W., Gajjar A., Robinson G.W., Taylor M.D., Jaunmuktane Z., Ryzhova M., Platten M., Unterberg A., Wick W., Karajannis M.A., Mittelbronn M., Acker T., Hartmann C., Aldape K., Schüller U., Buslei R., Lichter P., Kool M., Herold-Mende C., Ellison D.W., Hasselblatt M., Snuderl M., Brandner S., Korshunov A., von Deimling A., Pfister S.M. DNA methylation-based classification of central nervous system tumours. Nature. 2018;555(7697):469–74. doi: 10.1038/nature26000.Capper D., Jones D.T.W., Sill M., Hovestadt V., Schrimpf D., Sturm D., Koelsche C., Sahm F., Chavez L., Reuss D.E., Kratz A., Wefers A.K., Huang K., Pajtler K.W., Schweizer L., Stichel D., Olar A., Engel N.W., Lindenberg K., Harter P.N., Braczynski A.K., Plate K.H., Dohmen H., Garvalov B.K., Coras R., Hölsken A., Hewer E., Bewerunge-Hudler M., Schick M., Fischer R., Beschorner R., Schittenhelm J., Staszewski O., Wani K., Varlet P., Pages M., Temming P., Lohmann D., Selt F., Witt H., Milde T., Witt O., Aronica E., Giangaspero F., Rushing E., Scheurlen W., Geisenberger C., Rodriguez F.J., Becker A., Preusser M., Haberler C., Bjerkvig R., Cryan J., Farrell M., Deckert M., Hench J., Frank S., Serrano J., Kannan K., Tsirigos A., Brück W., Hofer S., Brehmer S., Seiz-Rosenhagen M., Hänggi D., Hans V., Rozsnoki S., Hansford J.R., Kohlhof P., Kristensen B.W., Lechner M., Lopes B., Mawrin C., Ketter R., Kulozik A., Khatib Z., Heppner F., Koch A., Jouvet A., Keohane C., Mühleisen H., Mueller W., Pohl U., Prinz M., Benner A., Zapatka M., Gottardo N.G., Driever P.H., Kramm C.M., Müller H.L., Rutkowski S., von Hoff K., Frühwald M.C., Gnekow A., Fleischhack G., Tippelt S., Calaminus G., Monoranu C.M., Perry A., Jones C., Jacques T.S., Radlwimmer B., Gessi M., Pietsch T., Schramm J., Schackert G., Westphal M., Reifenberger G., Wesseling P., Weller M., Collins V.P., Blümcke I., Bendszus M., Debus J., Huang A., Jabado N., Northcott P.A., Paulus W., Gajjar A., Robinson G.W., Taylor M.D., Jaunmuktane Z., Ryzhova M., Platten M., Unterberg A., Wick W., Karajannis M.A., Mittelbronn M., Acker T., Hartmann C., Aldape K., Schüller U., Buslei R., Lichter P., Kool M., Herold-Mende C., Ellison D.W., Hasselblatt M., Snuderl M., Brandner S., Korshunov A., von Deimling A., Pfi ster S.M. DNA methylation-based classifi cation of central nervous system tumours. Nature. 2018;555(7697):469–74. doi: 10.1038/nature26000.Capper D., Stichel D., Sahm F., Jones D.T.W., Schrimpf D., Sill M., Schmid S., Hovestadt V., Reuss D.E., Koelsche C., Reinhardt A., Wefers A.K., Huang K., Sievers P., Ebrahimi A., Schöler A., Teichmann D., Koch A., Hänggi D., Unterberg A., Platten M., Wick W., Witt O., Milde T., Korshunov A., Pfister S.M., von Deimling A. Practical implementation of DNA methylation and copy-number-based CNS tumor diagnostics: the Heidelberg experience. Acta Neuropathol. 2018;136(2):181–210. doi: 10.1007/s00401-018-1879-y.Capper D., Stichel D., Sahm F., Jones D.T.W., Schrimpf D., Sill M., Schmid S., Hovestadt V., Reuss D.E., Koelsche C., Reinhardt A., Wefers A.K., Huang K., Sievers P., Ebrahimi A., Schöler A., Teichmann D., Koch A., Hänggi D., Unterberg A., Platten M., Wick W., Witt O., Milde T., Korshunov A., Pfi ster S.M., von Deimling A. Practical implementation of DNA methylation and copy-number-based CNS tumor diagnostics: the Heidelberg experience. Acta Neuropathol. 2018;136(2):181–210. doi: 10.1007/s00401-018-1879-y.Рыжова М.В., Галстян С.А., Телышева Е.Н. Значение оценки метилирования ДНК в морфологической диагностике опухолей ЦНС. Архив патологии. 2022;84(3):65–75. doi: 10.17116/patol20228403165.Ryzhova M.V., Galstyan S.A., Telysheva E.N. Signifi cance of DNA methylation assessment in the morphological diagnosis of brain tumours. Arkhiv patologii = Pathology Archive. 2022;84(3):65 75. (In Russ.).Рыжова М.В., Телышева Е.Н., Шайхаев Е.Г., Старовойтов Д.В., Котельникова А.О., Галстян С.А., Оконечников К.В. Современные диагностические возможности молекулярного исследования опухолей мозга в центре нейрохирургии им. акад. Н.Н. Бурденко. Журнал Вопросы нейрохирургии им. Н.Н. Бурденко. 2021;85(6):98–101. doi: 10.17116/neiro20218506192.Ryzhova M.V., Telysheva E.N., Shaikhaev E.G., Starovoitov D.V., Kotelnikova A.O., Galstyan S.A., Okonechnikov K.V. Current diagnostic methods in molecular classifi cation of brain tumors at the Burdenko Neurosurgical Center. Zhurnal Voprosy Neirokhirurgii Imeni N.N. Burdenko = Burdenko’s Journal of Neurosurgery. 2021;85(6):98–101. (In Russ.).Петрова Е.И., Галстян С.А., Телышева Е.Н., Рыжова М.В. Визуализация результатов анализа структуры метилирования ДНК как инструмент контроля качества молекулярной классификации опухолей ЦНС. Российский нейрохирургический журнал им. проф. А.Л. Поленова. 2022;14(4):64–70. doi: 10.56618/20712693_2022_14_4_64.Petrova E.I., Galstyan S.A., Telysheva E.N., Ryzhova M.V. Visualization of DNA methylation profi ling data as a quality control tool for molecular classifi cation of CNS tumors. Rossiyskiy neyrokhirurgicheskiy zhurnal imeni professora A.L. Polenova = Russian Neurosurgical Journal named after prof. A.L. Polenov. 2022;14(4):64–70. (In Russ.).Aryee M.J., Jaffe A.E., Corrada-Bravo H., Ladd-Acosta C., Feinberg A.P., Hansen K.D., Irizarry R.A. Minfi: a flexible and comprehensive Bioconductor package for the analysis of Infinium DNA methylation microarrays. Bioinformatics. 2014;30(10):1363–9. doi: 10.1093/bioinformatics/btu049.Aryee M.J., Jaff e A.E., Corrada-Bravo H., Ladd-Acosta C., Feinberg A.P., Hansen K.D., Irizarry R.A. Minfi : a fl exible and comprehensive Bioconductor package for the analysis of Infi nium DNA methylation microarrays. Bioinformatics. 2014;30(10):1363–9. doi: 10.1093/bioinformatics/btu049.Mansell G., Gorrie-Stone T.J., Bao Y., Kumari M., Schalkwyk L.S., Mill J., Hannon E. Guidance for DNA methylation studies: statistical insights from the Illumina EPIC array. BMC Genomics. 2019;20(1):366. doi: 10.1186/s12864-019-5761-7.Mansell G., Gorrie-Stone T.J., Bao Y., Kumari M., Schalkwyk L.S., Mill J., Hannon E. Guidance for DNA methylation studies: statistical insights from the Illumina EPIC array. BMC Genomics. 2019;20(1):366. doi: 10.1186/s12864-019-5761-7.Bady P., Sciuscio D., Diserens A.C., Bloch J., van den Bent M.J., Marosi C., Dietrich P.Y., Weller M., Mariani L., Heppner F.L., Mcdonald D.R., Lacombe D., Stupp R., Delorenzi M., Hegi M.E. MGMT methylation analysis of glioblastoma on the Infinium methylation BeadChip identifies two distinct CpG regions associated with gene silencing and outcome, yielding a prediction model for comparisons across datasets, tumor grades, and CIMP-status. Acta Neuropathol. 2012;124(4):547–60. doi: 10.1007/s00401-012-1016-2. Erratum in: Acta Neuropathol. 2013;126(1):159.Bady P., Sciuscio D., Diserens A.C., Bloch J., van den Bent M.J., Marosi C., Dietrich P.Y., Weller M., Mariani L., Heppner F.L., Mcdonald D.R., Lacombe D., Stupp R., Delorenzi M., Hegi M.E. MGMT methylation analysis of glioblastoma on the Infi nium methylation BeadChip identifi es two distinct CpG regions associated with gene silencing and outcome, yielding a prediction model for comparisons across datasets, tumor grades, and CIMP-status. Acta Neuropathol. 2012;124(4):547–60. doi: 10.1007/s00401-012-1016-2. Erratum in: Acta Neuropathol. 2013;126(1):159.Teschendorff A.E., Breeze C.E., Zheng S.C., Beck S. A comparison of reference-based algorithms for correcting cell-type heterogeneity in Epigenome-Wide Association Studies. BMC Bioinformatics. 2017;18(1):105. doi: 10.1186/s12859-017-1511-5.Teschendorff A.E., Breeze C.E., Zheng S.C., Beck S. A comparison of reference-based algorithms for correcting cell-type heterogeneity in Epigenome-Wide Association Studies. BMC Bioinformatics. 2017;18(1):105. doi: 10.1186/s12859-017-1511-5.Grabovska Y., Mackay A., O’Hare P., Crosier S., Finetti M., Schwalbe E.C., Pickles J.C., Fairchild A.R., Avery A., Cockle J., Hill R., Lindsey J., Hicks D., Kristiansen M., Chalker J., Anderson J., Hargrave D., Jacques T.S., Straathof K., Bailey S., Jones C., Clifford S.C., Williamson D. Pediatric pan-central nervous system tumor analysis of immune-cell infiltration identifies correlates of antitumor immunity. Nat Commun. 2020;11(1):4324. doi: 10.1038/s41467-020-18070-y.Grabovska Y., Mackay A., O’Hare P., Crosier S., Finetti M., Schwalbe E.C., Pickles J.C., Fairchild A.R., Avery A., Cockle J., Hill R., Lindsey J., Hicks D., Kristiansen M., Chalker J., Anderson J., Hargrave D., Jacques T.S., Straathof K., Bailey S., Jones C., Cliff ord S.C., Williamson D. Pediatric pan-central nervous system tumor analysis of immune-cell infi ltration identifi es correlates of antitumor immunity. Nat Commun. 2020;11(1):4324. doi: 10.1038/s41467-020-18070-y.Chen Z., Hambardzumyan D. Immune Microenvironment in Glioblastoma Subtypes. Front Immunol. 2018;9:1004. doi: 10.3389/fimmu.2018.01004.Chen Z., Hambardzumyan D. Immune Microenvironment in Glioblastoma Subtypes. Front Immunol. 2018;9:1004. doi: 10.3389/fi mmu.2018.01004.Mo F., Pellerino A., Soffietti R., Rudà R. Blood-Brain Barrier in Brain Tumors: Biology and Clinical Relevance. Int J Mol Sci. 2021;22(23):12654. doi: 10.3390/ijms222312654.Mo F., Pellerino A., Soffi etti R., Rudà R. Blood-Brain Barrier in Brain Tumors: Biology and Clinical Relevance. Int J Mol Sci. 2021;22(23):12654. doi: 10.3390/ijms222312654. 17. Han S., Ma E., Wang X., Yu C., Dong T., Zhan W., Wei X., Liang G., Feng S. Rescuing defective tumor-infi ltrating T-cell proliferation in glioblastoma patients. Oncol Lett. 2016;12(4):2924–9. doi: 10.3892/ol.2016.4944.Han S., Ma E., Wang X., Yu C., Dong T., Zhan W., Wei X., Liang G., Feng S. Rescuing defective tumor-infiltrating T-cell proliferation in glioblastoma patients. Oncol Lett. 2016;12(4):2924–9. doi: 10.3892/ol.2016.4944.Zhai L., Ladomersky E., Lauing K.L., Wu M., Genet M., Gritsina G., Győrff y B., Brastianos P.K., Binder D.C., Sosman J.A., Giles F.J., James C.D., Horbinski C., Stupp R., Wainwright D.A. Infi ltrating T Cells Increase IDO1 Expression in Glioblastoma and Contribute to Decreased Patient Survival. Clin Cancer Res. 2017;23(21):6650–60. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-17-0120.Zhai L., Ladomersky E., Lauing K.L., Wu M., Genet M., Gritsina G., Győrffy B., Brastianos P.K., Binder D.C., Sosman J.A., Giles F.J., James C.D., Horbinski C., Stupp R., Wainwright D.A. Infiltrating T Cells Increase IDO1 Expression in Glioblastoma and Contribute to Decreased Patient Survival. Clin Cancer Res. 2017;23(21):6650–60. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-17-0120.Zhai L., Ladomersky E., Lauing K.L., Wu M., Genet M., Gritsina G., Győrffy B., Brastianos P.K., Binder D.C., Sosman J.A., Giles F.J., James C.D., Horbinski C., Stupp R., Wainwright D.A. Infiltrating T Cells Increase IDO1 Expression in Glioblastoma and Contribute to Decreased Patient Survival. Clin Cancer Res. 2017;23(21):6650–60. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-17-0120.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.